高效液相色譜分析是一種高效，快速，準確的分離分析方法，廣泛應用于石油化工、生命科學、環(huán)境、醫(yī)藥及食品安全行業(yè)。本文給大家介紹高效液相色譜分析方法開發(fā)的一般流程。

高效液相色譜分析方法開發(fā)的步驟應考慮如下內容：

a)      信息調研：通過文獻或其他來源，收集原料藥的相關信息

b)     溶解度研究：確定溶解度情況和最大吸收波長

c)      色譜條件選擇：根據(jù)溶解度研究結果、化合物的保留時間等信息確定色譜柱、流動性、進樣樣品

d)     進行初步的HPLC分析檢測，最初階段的HPLC測試傾向采用的參數(shù)見表1。

e)      確定梯度或等度模式

f)      優(yōu)化色譜條件提高分離度：通過改變流動性組成、緩沖鹽、pH、色譜柱、流速、溫度等實現(xiàn)合適的分離度

g)     進行原料藥的強降解試驗確定方法的適用性

h)     確定系統(tǒng)適用性參數(shù)

i)       方法總結并完成開發(fā)報告

j)       進行方法驗證